欧美老妇BBBWWBBBWW,日韩精品国产欧美,久久av男人天堂,久久婷婷大香萑太香蕉av人

免費(fèi)咨詢熱線:
15522676233
技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)中心 > 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的常見(jiàn)問(wèn)題

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的常見(jiàn)問(wèn)題

 更新時(shí)間:2024-07-18 點(diǎn)擊量:271
  細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的常見(jiàn)問(wèn)題
  細(xì)胞冷凍保存是細(xì)胞保留的主要方式之一。借助冷凍技術(shù),將細(xì)胞置于-196℃的液氮中,可使其暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)并保持其細(xì)胞特性,以備日后在實(shí)驗(yàn)中復(fù)蘇使用。這一方法不僅可以預(yù)防正在培養(yǎng)的細(xì)胞遭受污染或其他意外情況而導(dǎo)致種群?jiǎn)适?,同時(shí)也發(fā)揮了細(xì)胞保護(hù)的功效。那么你知道細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的常見(jiàn)問(wèn)題嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
  一、細(xì)胞凍存為什么要添加保護(hù)劑
  細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境,減少細(xì)胞代謝,以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。
  細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成水晶從而引發(fā)一系列的不良反應(yīng):首先,部分蛋白質(zhì)因局部電解質(zhì)濃度增高和pH值改變而變性,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。其次,細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成和細(xì)胞膜系統(tǒng)上蛋白質(zhì),酶的變性等會(huì)限礙細(xì)胞的能量代謝。再次,胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體在冷凍中易發(fā)生破壞引起胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物喪失。最后,隨著冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成DNA的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生損傷從而引起細(xì)胞死亡。添加冷凍保護(hù)劑可以很好的改善細(xì)胞的破壞與死亡情況。
  二、冷凍管應(yīng)如何解凍
  從液氮中取出細(xì)胞置-80℃冰箱中數(shù)分鐘,讓管中液氮控發(fā)后,再放入37℃的水浴鍋中(預(yù)防凍存管爆裂,凍存管內(nèi)有液氮的話,直接放入37℃水浴鍋中可能爆裂)。
  輕搖凍存管使其最好在2min內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過(guò)凍存管管口,否則容易造成污染。
  三、高效進(jìn)行細(xì)胞凍存應(yīng)該注意什么
  1.緩慢冷凍:慢凍可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞不會(huì)因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害。相反,細(xì)胞內(nèi)若出現(xiàn)大結(jié)晶會(huì)引起細(xì)胞膜、細(xì)胞器的損傷和破裂。
  2.細(xì)胞活力及濃度:細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好、培養(yǎng)瓶致密度約為80-90%、活力達(dá)90%以上的狀態(tài)下凍存。細(xì)胞活力差的細(xì)胞在凍存后的成活率很小,因此,一定要在細(xì)胞旺盛分裂時(shí)期凍存。
  3.凍存密度:凍存時(shí)細(xì)胞密度少于5x105個(gè)活細(xì)胞/mL時(shí),很難成功復(fù)蘇。
  4.凍存管蓋子:凍存管的蓋子一定要擰緊,否則水浴復(fù)蘇時(shí)水會(huì)滲入造成污染。
  5.凍存時(shí)間:細(xì)胞不可長(zhǎng)期保存在-80℃冰箱中。建議在-80℃冰箱中的保存時(shí)間不要超過(guò)48h(一般只需要12小時(shí)過(guò)夜即可)。
  更多有關(guān)細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的常見(jiàn)問(wèn)題,請(qǐng)聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司!
亚洲国产黑色丝袜在线观看| 国产日韩欧美三级在线| 区久久AAA片69亚洲| 亚洲AV狠狠爱一区二区三区| 亚洲日韩国产中文其他| 18禁超污无遮挡无码网址极速| 99国产欧美另娄久久久精品| 欧美日韩人妻精品一区| 国产午夜福利精品久久| 日韩欧美综合在线二区三区| 久久人人爽人人爽人人AV东京热| 日日碰狠狠添天天爽无码| 国产精品麻豆097| 久久精品国产欧美日韩| 日韩精品卡1卡2三卡四卡乱码| 沈阳老阿姨最后的巅峰| 免费国产作爱视频网站| 9999国产精品欧美久久久久久| 亚洲欧美国产中文字幕| 99热播| 欧美大片无需播放器久久| 亚洲一卡2卡三卡4卡2021国色天香| 国产精品亚洲日韩欧美色窝窝色欲| 欧洲-级毛片内射八十老太婆| 寂寞少妇被猛烈进入在线兔费观看| 中文字幕av免费专区久久| 又大又爽又硬的曰皮视频| A级国产乱理伦片| 精品亚洲国产日韩| 麻花传媒剧国产MV网站| 最新国产午夜精品视频不卡| 亚洲精品亚洲人成在线| 色噜噜色偷偷| 小sao货水好多真紧| 中文日韩国产在线| 欧美自慰喷水XXXSSS| 亚洲中文精品字幕| 99久热精品免费观看国产| 人妻中国字幕第一区| 日韩中文字幕亚洲| 欧美换爱交换乱理伦片|